Внешнесекреторную функцию печени оценивали по концентрации холевойкислоты, липидного комплекса и общего фосфора в содержимом двенадцатиперстнойкишки

4.2. ОРГАНОСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЕЧЕНИ
4.2.1. Внешнесекреторная функция
Внешнесекреторную функцию печени оценивали по концентрации холевой кислоты, липидного комплекса и общего фосфора в содержимом двенадцатиперстной кишки у человека при 49-суточной антиортостатической гипокинезии и в желчи у крыс при 30-суточном ограничении двигательной активности [Медкова И. Л., 1974]. Изучение динамики секреции холевой кислоты, липидного комплекса и общего фосфора в условиях 49-суточной гипокинезии позволило разделить обследуемых на две группы: первую группу составили 2, вторую — 3 человека. У обследуемых первой группы изменения внешнесекре-торной функции печени носили волнообразный характер. Концентрация исследуемых компонентов желчи на 14-е сутки гипокинезии увеличивалась, к 36-м суткам резко уменьшалась с последующим увеличением к 49-м суткам наблюдения. У обследуемых второй группы содержание изучаемых компонентов желчи повышалось на протяжении 36 сут гипокинезии, а к 49-м суткам, напротив, снижалось.
Содержание холевой кислоты в общем количестве желчных кислот у всех обследуемых составляло 30—40,% в фоновом периоде и повышалось на протяжении всего эксперимента у четырех обследуемых. У одного обследуемого процентное содержание холевой кислоты в фоновом периоде было более высоким (50%), на 14-и сутки оно снизилось, а к 49-м суткам вновь возросло.
Эксперименты на животных. На 3-й сутки после начала эксперимента у животных содержание холевой кислоты, липидного комплекса и общего фосфора резко возросло и составило для холевой кислоты 10 734,0±937,5 мг/л (контроль 7757±994,2 мг/л), для липидного комплекса 7,62±5,8 г/л (контроль 5,04±2,3 г/л) и общего фосфора 9,75±0,11 ммоль (контроль 0,61 ±0,06 ммоль). На 7-е сутки ограничения двигательной активности концентрация холевой кислоты продолжала повышаться по сравнению с ее уровнем на 3-й сутки и была на 56 % выше, чем в контроле. Содержание липидного комплекса и общего фосфора в этот период приближалось к исходному. На 15-е сутки ограничения двигательной активности отмечено некоторое снижение уровня холевой кислоты по сравнению с показателями на 7-е сутки и достоверное повышение содержания липидного комплекса и общего фосфора.
Колебания скорости секреции изучаемых компонентов желчи на 3-й, 7-е и 15-е сутки ограничения двигательной активности крыс повторяли динамику их концентраций.
После 15-суточного ограничения двигательной активности внешнесекреторную функцию печени изучали на 1, 3, 6, 12, 20, 35, 50 и 75-е сутки периода последействия. Были выявлены фазные изменения концентрации и скорости секреции компонентов желчи. Однако для холевой кислоты эти изменения в течение всего периода последействия не носили достоверного характера. Что касается липидного комплекса, то на 1, 6, 20- и 35-е сутки было отмечено достоверное повышение его содержания в желчи по отношению к контролю. Секреция общего фосфора после   15-суточного ограничения двигательной активности имела тенденцию к повышению. Нормализация внешнесекреторной функции печени отмечалась к 50-м суткам периода последействия.
Ограничение двигательной активности крыс в течение 30 суток оказало выраженное стимулирующее влияние на желчеобразование. На 30-е сутки опыта и во все срок» периода последействия наблюдалась высокая степень достоверного повышения содержания холевой кислоты и липид-ного комплекса в желчи. Секреция этих компонентов носила фазный характер и за 1 ч на 100 г массы тела животного повторяла динамику их концентраций.
Поскольку на 20-е сутки восстановительного периода » описанном эксперименте тенденции к нормализации исследуемых компонентов желчи отмечено не было, проведена еще одна серия опытов, в которой внешнесекреторную функцию* печени после 30-суточного ограничения двигательной активности изучали на протяжении 3 мес периода последействия. В этом опыте в течение первых 3 сут наблюдалось достоверное повышение концентраций холевой кислоты, липидного комплекса и общего фосфора, особенно значительное для холевой кислоты. Затем эти показатели снизились и только на 65-е сутки периода последействия обнаруживалось достоверное повышение содержания липидного комплекса до 125 % по отношению к показателям контроля. На 90-е сутки все показатели находились в пределах нормы.
4.2.2. Метаболизм желчных кислот
У человека в содержимом двенадцатиперстной кишки при 120-суточной антиортостатической гипокинезии и в желчи у крыс при 90-суточном ограничении двигательной активности с углом наклона головного конца на — 20° исследовали спектр следующих жирных кислот: таурохолевой (ТХК), тауродезоксихолевой (ТДХК), гликохолевой (ГХК), глико-дезоксихолевой (ГДХК), гликохенодезоксихолевой (ГХДХК) [Смирнов К. В. и др., 1980; Жизневская О. В., Медкова И. Л., 1985; Жизневская О. В., 1986].
На 20-е сутки гипокинезии отмечено существенное увеличение концентрации ТХК в обеих порциях дуоденального содержимого, причем в порции С эти изменения были более выражены. К концу гипокинезии в порциях В и С концентрация этой кислоты приблизилась к фоновым значениям, а в восстановительном периоде была ниже исходного уровня. Количество ТДХК + ТХДК в обеих порциях желчи в начале гипокинезии возросло, далее имело место его уменьшение ниже фонового уровня на 90—112-е сутки исследования. В восстановительном периоде выявлено дальнейшее снижение содержания этих кислот. Уровень ТДХК+ТХДХК на 20-е сутки периода восстановления был почти в 3 раза меньше фоновых показателей. На 20-е сутки опыта отмечено резкое повышение количества ГХК в обеих порциях дуоденального содержимого, причем в порции В эти изменения были в высокой степени достоверны. На 67-е сутки уровень ГХК снизился в порции В до фонового значения, а в последующие сроки исследования продолжал достоверно падать. Уменьшение уровня ГХК в порции В на 20-е сутки восстановительного периода было наиболее выраженным. В порции С дуоденального содержимого также наблюдали тенденцию к снижению содержания ГХК на 67-е сутки гипокинезии » приближение его значения к фоновым на 112-е сутки исследования. На 7-е сутки восстановительного периода отмечено достоверное повышение уровня этой желчной кислоты. На 20-е сутки восстановительного периода изучаемый показатель был незначительно выше фоновых данных. Концентрация ГДХК+ГХДХК в порции В значительно увеличивалась на 20-е сутки обследования, а начиная с 67-х суток гипокинезии падала ниже уровня фона, причем все с большой степенью достоверности. На 20-е сутки восстановительного периода значение этих величин оставалось еще достоверно сниженным по сравнению с фоном. Динамика содержания ГДХК + ГХДХК в порции С дуоденального содержимого в период гипокинезии была аналогичной таковой в порции В. На 20-е сутки восстановительного периода отмечена нормализация концентрации этих кислот в желчи.
По сумме желчных кислот в обеих порциях желчи наблюдалось увеличение их содержания на 20-е сутки гипокинезии и дальнейшее последовательное снижение во все сроки исследования
В этот же срок отмечалось небольшое повышение отношения ГХК/ТХК в порции В дуоденального содержимого. На 67- и 90-е сутки выявлено резкое снижение этого показателя в порции В за счет увеличения содержания тауроконъюги-рованных кислот. В последующие сроки отношение ГХК/ТХК менялось незначительно. В порции С было отмечено постепенное увеличение коэффициента на 20- и 67-е сутки исследования до 5,2 (фон 1,8) за счет увеличения содержания гликоконъюги-рованных кислот ( 27,6). На 112-е сутки гипокинезии и 7-е сутки восстановительного периода отношение ГХК/ТХК нормализовалось, а на 20-е сутки восстановительного периода вновь резко выросло за счет снижения количества тауроконъ-югированных желчных кислот.
На 20-е сутки выявлено небольшое увеличение отношения триоксихолановых кислот к диоксихолановым в порции В дуоденального содержимого за счет более значительного повышения уровня ГХК. На 67-е сутки наметилась тенденция к нормализации коэффициента в этой порции желчи и к 20-м суткам восстановительного периода он становится ниже фонового за счет снижения концентрации триоксихолановых желчных кислот. В порции С наблюдали постепенное увеличение отношения триоксихолановых кислот к диоксихолановым на 20—67-е сутки гипокинезии за счет роста уровня ТХК и ГХК. В дальнейшем этот коэффициент менялся мало.
На 20-е сутки исследования обнаружено увеличение хола-тохолестеринового коэффициента за счет увеличения показателя суммы желчных кислот, более выраженное в порции С дуоденального содержимого
На 67-е сутки гипокинезии коэффициент уменьшился в 2 раза в обеих порциях желчи   по сравнению   с предыдущим сроком и продолжал падать ниже фонового уровня в последующие сроки гипокинезии. Это является результатом как снижения суммы холатов, так и роста концентрации холестерина в процессе продолжения ограничения двигательной активности. В период восстановления холатохолестериновый коэффициент в порции В стал еще меньше, а в порции С на 7-е сутки этот показатель нормализовался с последующим увеличением выше фонового значения к 20-м суткам восстановительного периода за счет снижения концентрации холестерина в желчи. Наряду с этим начиная с 67-х суток гипокинезии отмечено возрастание отношения фосфолипиды/холестерин (Ф/Х) в обеих порциях желчи, что объясняется значительным повышением содержания фосфолипидов в дуоденальном содержимом.
Эксперименты на животных. У животных на 7-е сутки ограничения двигательной активности скорость секреции желчи за 1 ч уменьшилась почти в 2 раза по сравнению с контрольной труппой животных (контроль 0,14 мл/ч на 100 г, опыт 0,063 мл/ч на 100 г) При исследовании спектра желчных кислот 7-е сутки гипокинезии характеризовались снижением уровня тауроконъю-гированных кислот, достоверным для ТХК ( 30). Концентрация ГХК в этот же срок практически не изменилась, а количество гликодиоксихолановых кислот увеличилось до 3,0± ±0,6 ммоль/л (фон 1,2+0,24 ммоль/л).    В результате выявленных изменений было отмечено увеличение коэффициента Г/Т-конъюгаты и уменьшение отношения триоксихолановых кислот к диоксихолановым по сравнению с контролем, что было связано с уменьшением концентрации ТХК и увеличением уровня ГДХК+ГХДХК. Суммарное содержание всех желчных кислот за неделю эксперимента уменьшилось за счет резкого снижения содержания таурохолатов.
На 30-е сутки эксперимента скорость секреции желчи сократилась на 41% по сравнению с группой контроля (контроль 0,095 мл/ч на 100 г, опыт 0,056 мл/ч на 100 г).
Изучение спектра желчных кислот позволило сделать вывод, что в этот срок опыта содержание таурокислот незначительно снизилось относительно показателей фона. Уровень ГХК превысил фоновый на 25%, а содержание ГДХК+ +ГХДХК стало меньше контрольного на 33%- Эти изменения не носили достоверного характера. Величина коэффициента Г/Т-конъюгаты и отношение триоксихолановых кислот к диоксихолановым стали выше контроля в связи с ростом количества ГХК и снижения содержания диоксихолановых желчных кислот. Все же преобладание усиления секреции ГХК привело к увеличению суммарного показателя всех желчных кислот по сравнению с контролем.
При исследовании спектра липидов желчи на 30-е сутки эксперимента было отмечено резкое (в 25 раз) и достоверное снижение содержания фосфолипидов и уменьшение почти в 2 раза концентрации холестерина. В результате этих изменений отношение Ф/Х снизилось до 0,15 (контроль 1,9), а холатохолестериновый коэффициент увеличился вдвое по сравнению с фоном.
После 2-месячного эксперимента скорость секреции желчи за 1 ч на 100 г массы животного была равна 0,1 мл (контроль 0,095 мл/ч на 100 г).
Изучение спектра желчных кислот показало, что количество ТХК достоверно превысило контрольное значение, а концентрация тауродиоксихолановых кислот оставалась близкой к фону. При этом уровень гликоконъюгированных кислот тоже стал выше контрольного.
Выявленные изменения обусловили суммарное увеличение содержания желчных кислот. В результате относительно большего роста концентрации ТХК по сравнению с гликоконъюги-ронанными кислотами показатель Г/Т-конъюгаты снизился. Отмеченное увеличение отношения триоксихолановых кислот к диоксихолановым явилось результатом роста триоксихолановых кислот.
Содержание холестерина и фосфолипидов на 60-е сутки опыта в желчи крыс уменьшилось, более достоверно для фосфолипидов. В связи с этим отношение Ф/Х стало ниже контрольного. Рост холатохолестеринового коэффициента объясняется повышением суммарной концентрации холатов.
Таким образом, 60-суточное ограничение двигательной активности с углом наклона — 20° проявилось в тенденции приближения скорости отделения желчи к контрольному значению. Выявлены усиление секреции в желчь всех гликоконъюгированных кислот и рост концентрации ТХК по сравнению с фоном. Это привело к понижению показателя Г/Т-конъюгаты и увеличению отношения триоксихолановых кислот к диокси- холановым. Уровень фосфолипидов в желчи оставался ниже фоновых значений. Наблюдается тенденция к нормализации содержания холестерина в желчи. Отсюда следует повышение отношения Ф/Х. Увеличение холатохолестеринового показателя связано с увеличением суммарного количества желчных кислот. Для сравнения характера изменений изучаемых показателей желчи в результате ограничения двигательной активности у крыс с углом наклона головного конца клетки — 20° параллельно был поставлен эксперимент, в котором животные находились в специальных гипокинетических клетках без наклона.
На 60-е сутки гипокинезии скорость секреции желчи о 1,7 раза превышала фоновые показатели (фон 0,095 мл/ч на 100 г).
При исследовании отмечено снижение содержания ТХК и ГДХК+ГХДХК. Содержание тауродиоксихолановых кислот незначительно уменьшилось, а концентрация ГХК увеличилась по сравнению с контрольной. В результате несколько уменьшилось суммарное содержание желчных кислот. Снижение концентрации тауроконъюгированных кислот на фоне роста уровня ГХК привело к повышению соотношения Г/Т-конъюга-ты. Более значительное снижение концентрации диоксихолано-вых кислот способствовало росту отношения триоксихолано-вых кислот к диоксихолановым.
Исследование липидных фракций также показало контрастные параллельному эксперименту результаты, выраженные в росте относительно фона концентраций фосфолипидов и холестерина, причем в большей степени последнего. Выявленные изменения привели к уменьшению отношения Ф/Х и почти в 2 раза холатохолестеринового коэффициента.
Таким образом, горизонтальная гипокинезия в течение 60 сут приводила к снижению массы тела крыс до 10% по. отношению к исходной. При этом выявлено резкое усиление секреции желчи (в 1,7 раза) по сравнению с контролем. Гипокинезия в различной степени повлияла на снижение концентрации всех тауроконъюгированных и гликодиоксихолановых кислот, в большей мере на ГДХК+ГХДХК. При этом концентрация ГХК увеличилась. Все это привело к снижению суммированного содержания холатов и увеличению их коэффициентов. В эксперименте отмечено увеличение содержания в желчи фосфолипидов и особенно холестерина, что способствовало снижению коэффициентов Ф/Х и холатохолестеринового.
С целью изучения более длительного действия фактора ограничения двигательной активности на изучаемые показатели крыс содержали в клетках-пеналах в течение 90 сут.
На 90-е сутки эксперимента скорость секреции желчи за 1 ч на 100 г массы тела удвоилась по сравнению с показателями контрольной партии животных.
При исследовании спектра желчных кислот у опытной группы отмечено достоверное снижение уровня ТХК и увеличение концентраций тауродиоксихолановых кислот. Содержание изучаемых гликоконъюгированных кислот на 90-е сутки также незначительно уменьшилось. Преобладание уменьшения отдельных показателей желчных кислот привело и к общему снижению показателя суммы всех изучаемых конъюгирован-ных кислот. Резкое уменьшение содержания ТХК способствовало повышению коэффициента Г/Т-конъюгаты. Снижение концентрации триоксихолановых желчных кислот привело к уменьшению их отношения к диоксихолановым кислотам.
Изучение содержания спектра липидов в желчи крыс показало незначительный рост уровня фосфолипидов и снижение содержания холестерина, что повлияло на увеличение коэффициентов Ф/Х и холатохолестеринового.
Таким образом, более длительная 90-суточная гипокинезия характеризовалась повышением   скорости   желчеотделения в 2 раза по сравнению с контролем. На фоне увеличения содержания тауродиоксихолановых кислот выявлено снижение концентраций ТХК и гликоконъюгированных желчных кислот, более достоверное для ТХК- Выявленные изменения обусловили уменьшение суммированного содержания конъюгированных кислот, увеличение соотношения Г/Т-конъюгаты и уменьшение отношения триоксихолановых кислот к диоксихолановым. Наряду с незначительным ростом показателя фосфолипидов отмечено несущественное падение уровня холестерина.
4.2.3. Морфологические исследования
В печени животных после 20-суточной гипокинезии обнаружено много мелких и крупных липидных капель, расположенных в основном централобулярно [Логинов А. С. и др., 1979] ( 31). При электронно-микроскопическом исследовании крупные липидные включения найдены в синусоидах. Органел-лы гепатоцитов имели обычный вид, гликоген не был изменен ( 32). Сохранность ультраструктуры гепатоцитов и наличие лшшдпых гранул авторы рассматривают как доказательство илфильтративного ожирения печени. Причину этого они видят в стресс-реакции, при которой мобилизуются энергетические ресурсы организма.